葛城美里是NERV战术作战部的作战指挥官，也是碇真嗣和明日香的监护人。她在工作时果断、敢冒险，能在使徒来袭的极短时间内制定EVA出击方案；离开指挥室后，她的公寓却堆着啤酒罐和生活杂物，像完全换了一个人。美里把真嗣接到自己家中生活，不只是为了方便监护驾驶员，也因为她知道被父亲推向陌生战场的孩子如果连一个饭桌都没有，会更快被NERV吞掉。她粗枝大叶、爱喝酒、常把家务推给真嗣，却也以自己的方式给了真嗣最早的“家”。温泉企鹅Pen Pen、便利店食物和乱糟糟的客厅，成了真嗣理解日常的第一块落脚点。
美里的过去与第二次冲击紧密相连。她的父亲葛城博士率领南极调查队，而那场灾难夺走了世界的一半人口，也夺走了美里的童年。父亲在最后关头救下她，并把十字项链留给她。美里因此长期无法原谅父亲，也无法摆脱“为什么只有我活下来”的阴影。她加入NERV，一方面是为了对抗使徒，另一方面也是为了追查第二次冲击和父亲死亡背后的真相。她在战术上看似大胆，内心却始终被幸存者的罪恶感和复仇心推动。她对使徒的恨意很真实，但她对驾驶员的关心也同样真实，这两者常在同一条命令中互相撕扯。
在作战现场，美里不只是站在屏幕前喊出击。雷天使作战中，她筹划使用全国电力的阳电子炮狙击；面对从卫星轨道坠落的使徒，她敢让三台EVA分区奔跑接住目标；对抗分裂、侵蚀和心理污染型使徒时，她也必须在技术部门、MAGI判断和驾驶员情绪之间快速做决定。她信任真嗣、明日香和绫波的能力，却也清楚自己每一次“出击”都是把孩子送进可能无法返回的地方。她的指挥越熟练，背后的罪恶感越难被爽朗笑容盖住。
与加持良治、赤木律子的关系让美里的NERV生活更复杂。加持是她大学时期的恋人，轻浮外表下掌握着NERV、SEELE和加持本人所追查的秘密；律子则是她的旧友，也是EVA技术体系的核心人物。随着故事推进，美里逐渐发现NERV并非单纯保护人类的组织，人类补完计划、亚当、莉莉丝、Dummy Plug和源堂的意图都隐藏在使徒战斗的背后。加持把情报和钥匙交到她手中后死去，律子也在母亲、MAGI和源堂之间显露裂痕。美里越接近真相，就越难继续只把自己当作现场指挥官。
旧剧场版中，战略自卫队攻入NERV本部，美里在混乱中保护真嗣，强行把他送往初号机。她自己身负重伤，仍用最后的力气把项链交给真嗣，要求他活下去并亲眼做出选择。美里不是完美监护人，也不是永远正确的军官；她会逃避亲密，会用酒精和玩笑遮住恐惧，会把孩子推向战场，也会在最关键时替孩子挡住枪火。但在世界终局到来时，她仍把自己能给出的全部生命、真相和道路交给真嗣。葛城美里走过的路，是一个第二次冲击幸存者在复仇、职责、爱与罪恶感之间挣扎到最后的记录。